Metodologia

Exames Coprológicos

São inúmeros os métodos de exames coprológicos descritos na literatura, os quais podem ser qualitativos ou quantitativos, apresentando diferentes sensibilidades na detecção de ovos e larvas de helmintos e cistos de protozoários. A seguir, alguns dos métodos e soluções utilizados de rotina em laboratórios para análise.





Solução de lugol
Lugol - 2,0 g
Iodeto de Potássio - KI - 4,0 g
Água destilada - completar para 100 mL

MIF (Mertiolato, Iodo e Formaldeído) - Conservante de fezes
Glicerina - 5 mL
Formaldeído (40%) - 25 mL
Mertiolato (ou mercurocromo) 0,1% - 200 mL
Água destilada - 200 mL
Solução de lugol - 43 mL
TOTAL - 473 mL


SAF (Acetato de Sódio, Ácido Acético e Formaldeído) - Conservante de Fezes
Acetato de Sódio - 15 g
Ácido Acético - 20 mL
Formadeído (40%) - 40 mL
Água destilada - 925 mL
TOTAL - 1000 mL

EXAME DIRETO

Utilizado para pesquisa de cistos de protozoários e ovos de helmintos. método pouco sensível e só apresenta resultados positivos em infecções massivas.
Procedimento: Adicionar solução de lugol às fezes, preparar a lâmina e observar direto ao microscópio em aumento de 100X e 400X.
 
 
MÉTODO DE HOFFMAN, PONS & JANER ou HPJ (Sedimentação espontânea)

Utilizado na pesquisa de cistos de protozoários e ovos de helmintos.

1. Dissolver cerca de 10g de fezes em 10 ml de H2O em frasco pequeno
2. Filtrar em gaze dobrada em quatro, utilizando um cálice de sedimentação
3. Lavar o frasco 2X despejando a água na gaze
4. Completar o cálice com água e homogenizar com bastão de vidro.
5. Deixar em repouso de 2 a 24 horas.
6. Com uma pipeta tampada, retirar uma amostra do fundo do vértice do cálice, destampando a pipeta após imergí-la.
7. Examinar ao microscópio, adicionando uma gota da solução de lugol.


MÉTODO DE WILLIS

Utilizado na pesquisa de ovos de helmintos.

1. Dissolver cerca de 5g de fezes em uma solução saturada de NaCl.
2. Filtrar em gaze dobrada em quatro em frasco de Borrel e completar com a solução saturada de NaCl até formar um menisco convexo na boca do frasco.
3. Colocar uma lâmina por sobre as bordas do frasco para que fique em contato com o líquido ao menos por 5 minutos.
4. Retirar a lâmina sem escorrer o líquido e examinar ao microscópio.


MÉTODO DE FAUST (Centrífugo-flutuação)

Utilizado na pesquisa de cistos de protozoários e ovos de helmintos.

1. Dissolver cerca de 5g de fezes em 10ml de água e filtrar em gaze dobrada em quatro.
2. Depositar o material em tubo cônico de centrífuga e centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos.
3. Desprezar o sobrenadante e ressuspender novamente em 10 ml de água.
4. Repetir os passos 2 e 3 até que o sobrenadante apresente-se claro.
5. Adicionar 10 ml de sulfato de zinco (ZnSO2) 33 %, densidade 1.180, homogenizar e centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos.
6. Recolher com alça de platina a película superficial, adicionar uma gota da solução de lugol e observar ao microscópio.


MÉTODO DE RITCHIE

Utilizado na pesquisa de cistos de protozoários.

1. Idêntico ao método de FAUST até o ítem 4.
2. Adicionar cerca de 8 ml de formol a 10%, homogenizar, descansar por 10 a 20 minutos.
3. Adicionar cerca de 2 ml de éter, agitar vigorosamente e centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos.
4. Desprezar o sobrenadante e examinar o depósito ao microscópio adicionando uma gota da solução de lugol.


MÉTODO DE BAERMANN-MORAES

Utilizado na pesquisa e isolamento de larvas de Strongyloides sp. de fezes e de larvas de nematóides do solo.

1. Em um funil de vidro, adicionar água a 40-41°C até o nível atingir 1/2 altura da amostra depositada em gaze dobrada em quatro ou em peneira apropriada na boca do funil.
2. Após duas horas, coletar amostras da água em vidro de relógio e examinar ao microscópio.
 
 
MÉTODO DE GRAHAM (Método da fita adesiva)

Utilizado na pesquisa de ovos de E. vermicularis.

1. Com auxílio de um tubo de ensaio, fazer pressão com uma fita gomada transparente (parte colante) sobre o ânus e região perianal.
2. Colar a fita em lâmina e observar ao microscópio.


MÉTODO DE KATO-KATZ

Utilizado principalmente na pesquisa de ovos de S. mansoni e outros helmintos.
Utilização do Kit (quantitativo - OPG):

1. Depositar uma pequena quantidade de fezes sobre uma folha de papel higiênico colocando a tela por cima e pressionando com a paleta.
2. Colocar sobre uma lâmina de vidro a placa de plástico e depositar no centro do orifício as fezes que ultrapassaram as malhas da tela (40 - 60 mg).
3. Comprimir as fezes no orifício da placa até completá-lo.
4. Sobrepor a lamínula de celofane (embebida em verde malaquita) e inverter a preparação realizando pressão com o polegar sobre a lâmina até obter uma uniformidade do material.
5. Deixar em repouso por cerca de 60 minutos a temperatura ambiente.
6. Contar todos os ovos encontrados e multiplicar o total por 24, resultando em ovos/grama de fezes.

Laboratório de Protozoologia - UFSC

Artigo por: Raphael Gonçalves Nicésio

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