Meios de Cultura

O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras informações para a sua identificação. É importante conhecer o potencial de crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material.
Alguns procedimentos são essenciais na hora da preparação de cada meio de cultura para a obtenção de melhores resultados e evitar contaminações, como nos diferentes casos: quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos não precisam estar esterilizados; quando distribuir o meio após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estéreis e os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilização seja por igual em todo o conteúdo dos tubos - tampas fechadas não permitem a entrada do vapor.


Ágar nutriente (AN)
Meio relativamente simples, de fácil preparo e barato, muito usado nos procedimentos do laboratório de microbiologia.
Utilidade: análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras submetidas à exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras, conservação e manutenção de culturas em temperatura ambiente, como método opcional para os laboratórios que não dispõem do método da criopreservação (congelamento das cepas em freezer à - 70ºC) e observação da esporulação de espécies de bacilos Gram positivos.
Interpretação:
Cor original do meio: branco opalescente
Positivo: Crescimento na superfície do ágar;
Negativo: Ausência de crescimento.

Ágar sangue (AS)
O meio, usando uma base rica, oferece ótimas condições de crescimento a maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos, úteis para a diferenciação de Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.
Utilidade: isolamento de microrganismos não fastidiosos, verificação de hemólise dos Streptococcus spp. e Staphylococcus spp. e usado na prova de satelitismo (para identificação presuntiva de Haemophilus spp.).
Interpretação:
Cor original do meio: vermelho.
Beta hemólise: presença de halo transparente ao redor das colônias semeadas (lise total dos eritrócitos).
Alfa hemólise: presença de halo esverdeado ao redor das colônias semeadas (lise parcial dos eritrócitos).
Gama hemólise (sem hemólise): ausência de halo ao redor das colônias (eritrócitos permanecem íntegros).

Ágar chocolate (CHOC)
Amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de microrganismos. À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos exigentes.
Utilidade: crescimento de microrganismos exigentes Haemophilus spp., Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e Moraxella spp.
Interpretação:
Cor original do meio: castanho escuro (chocolate).
Colônias de tamanho pequeno a médio, com pigmento amarelo: sugestivo de Neisseria spp,
Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp.
Colônias pequenas e delicadas, com pigmento creme claro: sugestivo de Haemophilus spp.

Ágar MacConkey (MC)
O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos especialmente enterococos e estafilococos. A concentração de sais de bile é relativamente baixa em comparação com outros meios, por isso não é tão seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o ágar SS.
Utilidade: isolar bacilos Gram negativos (enterobactérias e não fermentadores) e verificar a fermentação ou não da lactose.
Interpretação:
Cor original do meio: rosa avermelhado.
Crescimento de bacilos Gram negativos.
Colônias cor de rosa: fermentadoras de lactose.
Colônias incolores: não fermentadoras de lactose.
Não há crescimento de cocos Gram positivos.

Ágar Salmonella-Shigella (SS)
Possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sódio) que inibem microrganismos Gram positivos. A incorporação de lactose ao meio permite diferenciar se o microrganismo é lactose positiva (bactérias que fermentam a lactose produzem ácido que na presença do indicador vermelho neutro resultando na formação de colônias de cor rosa), e bactérias que não fermentam a lactose formam colônias transparentes. Tissulfato de sódio e o citrato férrico permitem a detecção de H²S evidenciado por formação de colônias de cor negra no centro.
Utilidade: selecionar e isolar espécies de Salmonella e Shigella, em amostras de fezes, alimentos e água.
Interpretação:
Cor original do meio: vermelho alaranjado.
Colônias com centro negro (H²S) ou colônias incolores: suspeita de Salmonella.
Colônias incolores: suspeita de Shigella spp.
Colônias cor de rosa ou vermelho: suspeita de Escherichia coli ou Klebsiella spp.
As bactérias não fermentadoras de lactose são incolores.
As bactérias fermentadoras de lactose aparecem na cor rosa.

Ágar Hektoen enteric (HE)
Os sais biliares e os corantes azul de bromotimol e fucsina ácida inibem o crescimento da maioria dos microrganismos Gram positivos. Lactose, sacarose e salicina fornecem carboidratos fermentáveis ​​para incentivar o crescimento e diferenciação de enterobactérias.
Utilidade: isolar e diferenciar os membros da espécie Salmonella e Shigella de outros Enterobacteriaceae.
Interpretação:
Cor original do meio: azul-esverdeado
Colônias amarelas a salmão: enterobactérias fermentadoras de carboidratos.
Colônias azuis-esverdeadas com ou sem centro preto: suspeita de Salmonella spp. e Shigella spp.

Ágar Cystine Lactose Electrolyte Deficient (CLED)
Usado para isolamento e quantificação de microrganismos presentes em amostras urina. A deficiência de eletrólitos inibe o véu de cepas de Proteus.
Utilidade: isolar e quantificar microrganismos Gram positivos, Gram negativos e leveduras.
Interpretação:
Cor original do meio: azul claro.
Colônias lactose positiva: cor amarela.
Colônias lactose negativa: cor azul.

Ágar Thayer-Martin Chocolate (TM)
É um meio rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o isolamento de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis, pois contém em sua fórmula antibióticos que inibem o crescimento de Neisserias saprófitas e outras bactérias, quando em amostras colhidas de sítios contaminados.
Utilidade: usado para o isolamento seletivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis, a partir do material de investigação.
Interpretação:
Cor original do meio: marrom-chocolate
Colônias pequenas e opacas: suspeita de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis.

Ágar Löwenstein-Jensen (LJ)
A base do meio é constituída por ovos integrais, o que permite amplo crescimento das micobactérias e o crescimento é satisfatório para o teste de niacina (que é positivo para Mycobacterium tuberculosis).
Utilidade: Isolamento primário das micobactérias.
Interpretação:
Cor original do meio: verde claro
Positivo: Crescimento de colônias amarelas
Negativo: ausência de crescimento.

Ágar Saboraud (AS)
Meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e filamentosos.
Utilidade: cultivo e crescimento de espécies de Candidas e fungos filamentosos, particularmente associados a infecções superficiais e caracterização macroscópica do fungo filamentoso (colônia gigante).
Interpretação:
Cor original do meio: amarelo claro opalescente.
Após o crescimento, deve-se seguir a identificação do microrganismo que cresceu.

Ágar Regan-Lowe (RL)
Consiste em uma base de carvão vegetal acrescida de sangue (carneiro ou cavalo) e cefalexina. O carvão e o amido atuam como absorventes, removendo qualquer substância inibitória, o sangue tem função desintoxicante e enriquecedor e a cefalexina inibe a maioria dos contaminantes da microbiota do trato respiratório.
Utilidade: isolamento do gênero Bordetella em amostras clínicas que são geralmente contaminadas com a microbiota do trato respiratório.
Interpretação:
Cor original do meio: preto
Colônias pequenas acinzentadas e brilhantes: suspeita de Bordetella pertussis e Bordetella parapertussis.

Ágar verde brilhante (BG)
O extrato de levedura e duas peptonas fornecem os nutrientes; a lactose e a sacarose, juntamente com o vermelho de fenol, fornecem um sistema de diferenciação que exclui os fermentadores da lactose e/ou sacarose (ex: E. coli), enquanto que as salmonelas não produzem ácido a partir destes açúcares.
Utilidade: isolamento de outras salmonelas que não sejam as S. Typhi, existentes nas fezes e em outros materiais.
Interpretação:
Cor original do meio: castanho
Colônias brancas a vermelhas rodeadas por zonas vermelhas: suspeita de Salmonella spp. ou Proteus spp.
Colônias amarelas a esverdeadas rodeadas por zonas amarelo-esverdeadas: suspeita de Escherichia coli, Klebsiella spp. ou Enterobacter spp.

Ágar Mueller-Hinton (MH)
Meio padronizado por Kirby e Bauer e pelo CLSI que oferece condições de crescimento das principais bactérias.
Utilidade: realização do teste de avaliação da resistência aos antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test para enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus, Enterococcus sp.
Interpretação:
Cor original do meio: amarelo palha.
A zona do diâmetro é particular para cada antibiótico e organismo, sendo comparado com diâmetros padronizados pelo CLSI, que determina cada microrganismo sendo sensível, intermediário ou resistente.

30 Comentários sobre “Meios de Cultura”

Marijara Tavares disse...
29 de novembro de 2014 01:18

Obrigada, me ajudou bastante....


Anônimo disse...
13 de março de 2015 19:03

Olá, pode me ajudar? Gostaria de saber o meio de cultura ideal para a bactéria E.coli...


Biomedicina Brasil disse...
13 de março de 2015 19:58

O meio de cultura mais utilizado é o ágar MacConkey. O ágar EMB e meios comerciais cromogênicos também podem ser úteis por diferenciá-las de outras bactérias.


Anônimo disse...
27 de março de 2015 22:35

Obrigada pela ajuda. Preciso fazer um trabalho de microbiologia sobre a E.coli .. desde utilidades e aplicações dessa bactéria até técnicas de isolamento , meio de cultura e quantificação, já havia pesquisado sobre esse MacConkey e sobre o EMB , o ágar Levine. Mas com sua ajuda, escolherei o ágar MacConkey.


jéssica cândido disse...
8 de abril de 2015 23:28

Muito boooom! Parabéns!


Anônimo disse...
9 de abril de 2015 21:26

Boa noite , qual o melhor meio para isolar e cultivar a E.coli? Preciso obter uma colônia pura e cultivá-la.


Biomedicina Brasil disse...
10 de abril de 2015 10:01

Esta pergunta já foi respondida em um comentário anterior. Espero ter ajudado.


Anônimo disse...
23 de abril de 2015 12:52

Eu acabei ingerindo um pouco de PCA com água destilada, uma quantidade mínima que estava na minha mão e passou para o alimento que eu comi. Hoje estou cólicas e um pouco de diarréia. O que devo fazer?


Biomedicina Brasil disse...
23 de abril de 2015 22:30

As cólicas e diarreia podem ser devido à composição do meio, que geralmente possui extrato de levedura. Procure se hidratar bem e se o problema persistir, consulte um médico.


micaele disse...
27 de abril de 2015 16:18

Ola por gentileza, quais sao os meios de cultura utilizados na analise microbiologica dos alimentos?


Biomedicina Brasil disse...
29 de abril de 2015 09:57

Olá Micaele, são vários meios de cultura utilizados. Os principais são Ágar Batata Dextrose (PDA), Ágar Padrão para Contagem (PCA), Baird Parker (BP) e os caldos Verde Brilhante (VB) e Escherichia coli (EC).


Anônimo disse...
20 de maio de 2015 14:30

O meio Ágar chocolate (CHOC), é eficaz para Streptococcus mutans?


Biomedicina Brasil disse...
22 de maio de 2015 20:24

Entre os meios de cultura mais utilizados na rotina, o ágar Chocolate e ágar Sangue são os mais nutritivos e mais indicados para Streptococcus spp.


Anônimo disse...
28 de maio de 2015 10:55

Oi, qual tipo de microrganismo o Ágar Sabouraud Dextrose é seletivo???


Biomedicina Brasil disse...
29 de maio de 2015 11:23

Como diz o artigo, é um meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e filamentosos. Este meio não é seletivo para nenhum fungo específico.


Anônimo disse...
14 de junho de 2015 12:55

Qual é a cor do Agar Manitol e do Agar EMB


Biomedicina Brasil disse...
14 de junho de 2015 20:54

O ágar Manitol tem uma cor próxima do rosa, enquanto o ágar EMB tem uma cor avermelhada, mais escura.


Anônimo disse...
6 de julho de 2015 10:34

Para fazer uma experiência de bactérias presentes no em diferentes lugares, qual o meio de Agar mais interessante?


Biomedicina Brasil disse...
6 de julho de 2015 12:09

Nesse caso é indicado usar um meio não-seletivo, como o TSA (trypticase soy agar), por exemplo.


Anônimo disse...
19 de julho de 2015 10:04

Olá! Bom dia. No agar cled quais as bactérias q costumam mudar a cor do meio p amarelo e qual quantidade d colonias p considerar o exame positivo? Se puder explicar tbm o q considero> ou < que 10 a quinta e se pelas características das colônias ja da p saber se é bgn ou cgn...?


Biomedicina Brasil disse...
20 de julho de 2015 20:58

As colônias lactose positivas e alguns cocos gram-positivos ficam amareladas no ágar CLED. A relevância da quantidade de UFC a ser considerada vai variar de acordo com cada caso, pois uroculturas podem ser analisadas juntamente com o resultado da urina 1. A contagem maior ou menor do que 10.000 dependerá da diluição na alça calibrada da semeadura, no qual cada UFC corresponderá a 100 ou 1.000 colônias bacterianas. Geralmente, as colônias de BGN são mais brilhantes do que CGP, mas o ideal mesmo é fazer um Gram para se certificar.


Andréia Gonçalves disse...
21 de julho de 2015 18:54

Boa noite!Gostaria de saber qual o Agar para cultivar sementes de orquídea,onde compra-lo e se possível qual o valor?Obrigada!


Biomedicina Brasil disse...
3 de agosto de 2015 19:45

Olá Andréia, não tenho conhecimento sobre este ágar.


Gi disse...
9 de agosto de 2015 08:37

Olá, gostaria de saber qual o agar ideal q devo usar para fazer cultura do leite "in natura".e se houver crescimento qual melhor meio para o antibiograma.


Biomedicina Brasil disse...
11 de agosto de 2015 09:24

O caldo bile verde brilhante 2% com tubo de Durhan é recomendado para a detecção de bactérias coliformes no leite e derivados. Geralmente não há necessidade de fazer antibiograma, pois a presença de qualquer quantidade de bactéria coliforme já descartaria o seu uso, mas o meio mais apropriado é o ágar Mueller-Hinton.


Gi disse...
12 de agosto de 2015 18:56

Obrigada pela atenção , mas acho q não expliquei corretamente , estou pretendendo fazer a cultura do leite in natura para identificar qual bactéria ( stafilococcus , estreptococcus , entre outras ) do gado contaminado e a partir daí tratá-lo para não prejudicar a qualidade do leite.


Biomedicina Brasil disse...
14 de agosto de 2015 10:03

Você pode ler um pouco mais sobre o assunto nesse artigo (http://ref.scielo.org/grq7p3), no qual os autores usaram o ágar TKT, ágar sal manitol, ágar MacConkey e ágar Sabouraud com 0,1 mg de cloranfenicol/mL.


Gabriele Silva disse...
16 de agosto de 2015 12:27

Olá!
Gostaria de saber qual o Agar mais indicado para análises microbianas do solo.
Obrigada desde já!


Gi disse...
16 de agosto de 2015 19:34

Obrigada ! Artigo muito bom


Biomedicina Brasil disse...
20 de agosto de 2015 16:34

Olá Gabriele, o Tryptic Soy Agar (TSA) é o meio mais indicado para quantificação bacteriana do solo. Se for uma análise mais específica, deve-se usar um meio apropriado para a bactéria ou fungo do estudo.


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